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免疫组织化实验代测技术分类
(1)根据染色方式分成:① 贴片染色
② 漂浮染色
(2)根据Ag—Ab结合方式分成:
① 直接法
② 间接法
③ 多层法
(3)按标记物的性质分成:
① 免疫荧光技术(免疫荧光法)
② 免疫酶技术(酶标抗体法、桥法、PAD 法、 ABC法)
③ 免疫金属技术(免疫铁蛋白法、免疫金 染色法、蛋白A金法)
免疫组织化实验代测标记物
(1)必要性:组织细胞内Ag—Ab结合反应一般是不可见的,若在镜下检测,则必须具有可视性标记物。
(2)常用标记物
① 荧光素:zui常用的是异硫一氰酸荧光素(Fluorescein isothiocyanate ,FITC) —— 荧光显微镜下 呈绿色荧光
四乙基罗达明(rho—damine RB200)——荧光显微镜下发橙红色荧光
② 酶:辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶。
③ 生物素:(Biotin)
④ 铁蛋白金等:主要应用于免疫电镜。其他:如同位素(因涉及污染和防护难一般不用)
应用
凡是组织细胞内具有抗原性的物质,如肽类、激素、神经递质、细胞因子、受体、表面抗原等等均可用免疫组织化学方法显示,因而目前在基础与科研中被广泛应用。zui近几年,分子生物学研究异常活跃,但zui终还要归到形态上来。用免疫组织化学方法对所研究的大分子分子进行定位,进而深入研究其功能。
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